- 相關(guān)推薦
B型肉毒毒素保護性抗原He在大腸桿菌中的可溶性高表達
目的:通過序列優(yōu)化及表達條件改進,在大腸桿菌中高效可溶性表達B型肉毒毒素保護性抗原Hc(Bont/B-Hc).方法:對Bont/B-Hc基因片段優(yōu)化,用大腸桿菌常用密碼子替換稀有密碼子,并將(G+C)含量由76.2%降至56.3%;人工合成多條具有重疊互補序列的寡核苷酸片段,采用重疊延伸PCR方法獲得了Bont/B-Hc的全長基因,并構(gòu)建了原核可溶性表達載體;將經(jīng)酶切和測序鑒定正確的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3)感受態(tài)細胞,用IPTG誘導(dǎo)Bont/B-Hc的表達并進行純化及Western印跡鑒定.結(jié)果和結(jié)論:目的蛋白在大腸桿菌BL21(DE3)中獲得了可溶性高表達,占菌體裂解液上清總蛋白的26.7%,表達量達到30 mg/L,是目前國內(nèi)外已知表達的最高水平;經(jīng)Ni柱一步純化后,目的蛋白純度可達到80.3%,為肉毒毒素中和抗體的制備及亞單位疫苗的研究奠定了基礎(chǔ).
作 者： 于蕊 王雙 余云舟 俞煒源 孫志偉 YU Rui WANG Shuang YU Yun-Zhou YU Wei-Yuan SUN Zhi-Wei 作者單位： 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院,生物工程研究所,北京,100071 刊 名： 生物技術(shù)通訊 ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)： 2008 19(3) 分類號： Q78 關(guān)鍵詞： B型肉毒毒素 保護性抗原He 可溶性高表達【B型肉毒毒素保護性抗原He在大腸桿菌中的可溶性高表達】相關(guān)文章：
How old is he05-04
靜物素描中的光線及寫生-講義教案B04-25
詩歌中的表達技巧教案09-25
可愛的肉肉作文08-27
可愛的肉肉作文06-10
b2b推廣活動方案09-27
拼音b的教案01-05
學(xué)科術(shù)語 B05-04
英漢表達差異—英語寫作中的攔路虎05-04