酸弗林蛋白酶酸性氨基酸簇分選蛋白-1的原核表達(dá)、純化及多克隆抗體制備

酸弗林蛋白酶酸性氨基酸簇分選蛋白-1的原核表達(dá)、純化及多克隆抗體制備

目的:原核表達(dá)和純化PACS-1,并制備其多克隆抗體.方法:通過RT-PCR擴(kuò)增出PACS-1的編碼基因,測(cè)序正確后克隆入原核表達(dá)載體pGEX4T-1,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21(DE3),以IPTG誘導(dǎo)PACS-1與GST融合蛋白的表達(dá)并經(jīng)Glutathione Sepharose 4B純化;經(jīng)SDS-PAGE和Western blot鑒定,應(yīng)用純化的蛋白免疫家兔制備多克隆抗體,用ELISA測(cè)定抗體的效價(jià).結(jié)果:表達(dá)和純化了PACS-1,并獲得了較高效價(jià)的抗血清.結(jié)論:獲得純化的PACS-1及其多克隆抗體,為進(jìn)一步研究PACS-1的功能奠定了基礎(chǔ).

作 者： 李英輝 劉忠湘 趙亞 黃豫曉 劉軍 薛采芳 萬磊 LI Ying-Hui LIU Zhong-Xiang ZHAO Ya HUANG Yu-Xiao LIU Jun XUE Cai-Fang WAN Lei   作者單位： 第四軍醫(yī)大學(xué),病原生物學(xué)教研室,陜西,西安,710032  刊 名： 生物技術(shù)通訊  ISTIC 英文刊名： LETTERS IN BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2008 19(3)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： PACS-1   原核表達(dá)   多克隆抗體  

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