活性污泥高質量總RNA提取的一種有效方法

活性污泥高質量總RNA提取的一種有效方法

摘要： 提取高質量的RNA是在基因表達水平上研究廢水生物處理過程活性污泥中微生物菌群變化及關鍵調控基因表達規(guī)律的必要條件,但由于活性污泥富含腐殖質與RNA酶,導致常規(guī)提取方法難以獲得高質量的RNA.本研究通過反復探索與試驗,得到了一種經濟而快捷的從活性污泥中提取高質量RNA的方法,即在PBS洗滌沉淀污泥的基礎上,用含PVP和巰基乙醇的CTAB(十六烷基溴化三甲胺)裂解液裂解活性污泥細胞,并與細胞中的核酸形成核酸-CTAB復合體,然后用酚-氯仿-異戊醇去除細胞裂解液中的蛋白,最后采用LiCl選擇性沉淀其中的RNA.經核酸蛋白測定儀和1 %變性瓊脂糖凝膠電泳檢測表明,用此方法提取的RNA均一性和完整性好,并且具有反轉錄活性. 作 者： 黎秋華    李平    陳忠正    吳錦華    梁世中    LI Qiu-hua    LI Ping    CHEN Zhong-zheng    WU Jin-hua    LIANG Shi-zhong   作者單位： 黎秋華,梁世中,LI Qiu-hua,LIANG Shi-zhong(華南理工大學生物科學與工程學院,廣東,廣州,510006)

李平,吳錦華,LI Ping,WU Jin-hua(華南理工大學環(huán)境科學與工程學院,廣東,廣州,510006)

陳忠正,CHEN Zhong-zheng(華南農業(yè)大學食品學院,廣東,廣州,510640) 

期 刊： 陜西科技大學學報（自然科學版）  ISTIC   Journal： JOURNAL OF SHAANXI UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE EDITION)  年，卷(期)： 2008, 26(4)  分類號： X172  關鍵詞： 活性污泥    RNA提取    CTAB   

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