嗜熱厭氧乙醇菌JW200轉(zhuǎn)化條件的研究

嗜熱厭氧乙醇菌JW200轉(zhuǎn)化條件的研究

嗜熱厭氧乙醇菌遺傳轉(zhuǎn)化系統(tǒng)的缺少,制約了對(duì)該菌理論基礎(chǔ)和應(yīng)用領(lǐng)域的進(jìn)一步研究.利用聚乙二醇(PEG6000)轉(zhuǎn)化和電轉(zhuǎn)化技術(shù),國際上首次實(shí)現(xiàn)了嗜熱厭氧乙醇菌JW200外源基因的導(dǎo)入.PEG轉(zhuǎn)化效率很低,因此選擇對(duì)電轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行優(yōu)化,轉(zhuǎn)化效率從4±3.2個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA提高到50±7.4個(gè)轉(zhuǎn)化子/μg質(zhì)粒DNA.實(shí)驗(yàn)表明獲得較高的轉(zhuǎn)化效率的必要條件是在細(xì)胞密度為OD660 0.2時(shí)添加甘氨酸與蔗糖后,繼續(xù)培養(yǎng)2h以及細(xì)胞在電擊前的收集與洗滌保持低溫.實(shí)驗(yàn)為利用基因工程手段改造嗜熱厭氧乙醇菌,從分子水平研究胞內(nèi)乙醇代謝途徑奠定了基礎(chǔ).

作 者： 彭惠 傅百靈 毛忠貴 邵蔚藍(lán) PENG Hui FU Bai-ling MAO Zhong-gui SHAO Wei-lan   作者單位： 彭惠,毛忠貴,PENG Hui,MAO Zhong-gui(江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,無錫,214036)

傅百靈,FU Bai-ling(南京師范大學(xué)微生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,南京,210097)

邵蔚藍(lán),SHAO Wei-lan(江南大學(xué)工業(yè)生物技術(shù)教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,無錫,214036;南京師范大學(xué)微生物工程重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,南京,210097) 

刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(11)  分類號(hào)： Q78  關(guān)鍵詞： 轉(zhuǎn)化   電轉(zhuǎn)化   條件優(yōu)化   嗜熱厭氧乙醇菌  

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