黃藤ISSR反應(yīng)體系的條件優(yōu)化

黃藤ISSR反應(yīng)體系的條件優(yōu)化

在利用ISSR技術(shù)對黃藤進行分子生物學(xué)研究過程中,對影響PCR 擴增效果的一些因素,如模板DNA濃度、Mg2+濃度、dNTPs濃度、Taq DNA聚合酶濃度、引物濃度以及退火溫度等指標進行篩選和優(yōu)化,獲得用于黃藤ISSR-PCR 分析最適宜的PCR反應(yīng)條件:20 μLPCR反應(yīng)體積中含有1×緩沖液,20 ng 模板DNA,2 mmol·L-1 MgCl2,100 μmol·L-1 dNTP,1.5 U Taq DNA聚合酶,0.4 μmol·L-1引物,2%甲酰胺,0.5 mmol·L-1亞精胺.擴增程序為:94 ℃預(yù)變性5 min;再35個循環(huán):94 ℃ 30 s,52 ℃ 45 s和72 ℃ 1.5 min;最后72 ℃延伸7 min.

作 者： 楊華 宋緒忠 尹光天 白嘉雨 甘四明 YANG Hua SONG Xu-zhong YIN Guang-tian BAI Jia-yu GAN Si-ming   作者單位： 楊華,宋緒忠,YANG Hua,SONG Xu-zhong(浙江省林業(yè)科學(xué)研究院,浙江,杭州,310023)

尹光天,白嘉雨,甘四明,YIN Guang-tian,BAI Jia-yu,GAN Si-ming(中國林業(yè)科學(xué)研究院熱帶林業(yè)研究所,廣東,廣州,510520) 

刊 名： 福建林學(xué)院學(xué)報  ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF FUJIAN COLLEGE OF FORESTRY  年，卷(期)： 2006 26(2)  分類號： Q946.33  關(guān)鍵詞： 黃藤   ISSR   優(yōu)化  

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