- 相關(guān)推薦
人lrp-cDNA全長編碼區(qū)的克隆及其在大腸桿菌中的表達
目的:擴增人lrp-cDNA全長編碼區(qū)、并在大腸桿菌中表達和鑒定.方法:提取脂多糖刺激后HEK293細胞的總RNA,通過RT-PCR的方法擴增出全長人lrp序列,將其克隆入原核表達載體pcTAT后轉(zhuǎn)化大腸桿菌誘導表達,做SDS-PAGE分析;并用免疫印跡法鑒定6His-TAT-LRG融合蛋白表達.結(jié)果:測序結(jié)果表明,獲得了全長人lrp-cDNA全長編碼區(qū),其序列與GenBank已經(jīng)公布的不完全一致;SDS-PAGE分析表明,6His-TAT-Lrp融合蛋白在大腸桿菌中成功表達,表達量約占菌體總蛋白的17%;免疫印跡法鑒定顯示,該融合蛋白可與相應抗血清產(chǎn)生陽性反應.結(jié)論:得到人lrp-cDNA全長編碼區(qū)序列,并成功表達,為人lrp功能的深入研究奠定了基礎(chǔ).
作 者： 宋慶賀 柴玉波 陳蘇民 陳南春 黃勇 代忠明 SONG Qing-He CHAI Yu-Bo CHEN Su-Min CHEN Nan-Chun HUANG Yong DAI Zhong-Ming 作者單位： 第四軍醫(yī)大學基礎(chǔ)部生物化學與分子生物學教研室,陜西,西安,710033 刊 名： 第四軍醫(yī)大學學報 ISTIC PKU 英文刊名： JOURNAL OF THE FOURTH MILITARY MEDICAL UNIVERSITY 年，卷(期)： 2006 27(5) 分類號： Q78 關(guān)鍵詞： 脂多糖 應答基因 逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應 基因表達【人lrp-cDNA全長編碼區(qū)的克隆及其在大腸桿菌中的表達】相關(guān)文章：
嗜肺軍團菌lvgA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達04-26
甲醇利用菌SDM11中g(shù)lyA基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達04-26
龍須菜藻紅蛋白亞基基因的克隆及其在大腸桿菌中的表達04-26
大腸桿菌RNaseⅢ基因的克隆與表達04-26
豬圓環(huán)病毒2型ORF2基因克隆及其在大腸桿菌中的融合表達04-27
大腸桿菌glgC基因的克隆及原核表達04-30