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荷斯坦種公牛血清替代補(bǔ)體溶血活性研究
本文將國外脊椎動(dòng)物血清補(bǔ)體溶血活性標(biāo)準(zhǔn)測定方法,運(yùn)用到荷斯坦種公牛研究中,首次建立了測定荷斯坦種公牛血清補(bǔ)體溶血ACH50的方法.種公牛血清經(jīng)相應(yīng)靶紅細(xì)胞吸附后,可溶解懸浮在EGTA-Mg-GVB緩沖液中的正常的兔血紅細(xì)胞、人A,B,AB,O型紅細(xì)胞,小鼠、大鼠、雞紅細(xì)胞,但對綿羊、山羊、豬紅細(xì)胞溶血活性較低;對奶牛紅細(xì)胞無溶血活性.且發(fā)現(xiàn)種公牛血清的溶血活性和靶紅細(xì)胞的動(dòng)物種類在系統(tǒng)發(fā)育上和種公牛的親緣關(guān)系遠(yuǎn)近沒有直接聯(lián)系.種公牛血清在EGTA-Mg-GVB緩沖液中對兔血紅細(xì)胞發(fā)生溶血的最適條件是:溫度是37℃,最適pH是7.3-7.4,最適Mg2+的濃度是4 mmol/L,最適孵育時(shí)間為90 min.溶血活性是二價(jià)離子依賴、熱敏感(溶血活性熱滅活溫度是56℃).種公牛血清對兔血紅細(xì)胞的溶血活性在受到酵母聚糖、甲胺、肼、EDTA、雞抗酵母聚糖牛血清結(jié)合物抗血清處理時(shí),溶血活性可全部或部分消失,溶血活性抑制程度與補(bǔ)體抑制劑濃度相關(guān).我們運(yùn)用建立的標(biāo)準(zhǔn)溶血方法并以兔血紅細(xì)胞作為指示細(xì)胞檢測不同年齡的53頭種公牛血清補(bǔ)體替代途徑的溶血活性,溶血值在13.2-44.3 u/ml之間,還發(fā)現(xiàn)不同年齡組公牛之間溶血活性有隨年齡增加而逐步增大趨勢,但差異不顯著(P＞0.05),在4-5歲公牛群中達(dá)到最大值.對種公牛血清補(bǔ)體系統(tǒng)溶血水平進(jìn)行系統(tǒng)研究,一方面可以填補(bǔ)國內(nèi)在此領(lǐng)域研究空白,另一方面也利于種公牛疾病監(jiān)測、控制,此外也為獸醫(yī)臨床診斷試劑的研制提供新的技術(shù)手段[動(dòng)物學(xué)報(bào) 52(4):698-705,2006].
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