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兩種泥鰍芳香化酶基因的克隆與時空表達
魚類的性別分化易受發(fā)育環(huán)境的影響.向性成熟的泥鰍和大鱗副泥鰍個體注射絨毛膜促性腺激素,獲得卵子和精子進行人工授精.把胚胎分別置于20℃、25℃和30℃條件下,使其發(fā)育.經(jīng)性腺檢查發(fā)現(xiàn)隨著溫度的升高兩種泥鰍中雄性個體所占的比例明顯升高,獲得明顯的偏雄比率群體.根據(jù)已知細胞色素P450芳香化酶CYP19b基因序列設計嵌套簡并引物用巢式PCR擴增并克隆出了兩種泥鰍的CYP19b的DNA片段.MaCYP19b片段和PdCYP19b片段分別長1337bp和1473bp.在此基礎上用各自的特異引物克隆出兩種泥鰍CYP19b的相應cDNA片段.通過基因組DNA和cDNA序列的比較證明兩種泥鰍的CYP19b基因均包含三個內(nèi)含子和四個外顯子,編碼的蛋白質(zhì)序列長145氨基酸殘基.以GAPDH基因為對照,分別對兩種泥鰍成體組織和不同發(fā)育階段的胚胎的CYP19b進行了半定量RT-PCR表達分析,結(jié)果表明泥鰍CYP19b基因只在成體泥鰍卵巢、腎以及原腸胚和神經(jīng)胚中表達.大鱗副泥鰍CYP19b基因在成體的腦、卵巢和腎以及神經(jīng)胚和卵黃吸收期表達.這些結(jié)果為揭示細胞色素P450芳香化酶基因與環(huán)境性別決定機制的關系奠定了基礎.
作 者: 杜啟艷 南平 燕帥國 常重杰 DU Qi-Yan NAN Ping YAN Shuai-Guo CHANG Zhong-Jie 作者單位: 河南師范大學生命科學學院,新鄉(xiāng),453007 刊 名: 水生生物學報 ISTIC PKU 英文刊名: ACTA HYDROBIOLOGICA SINICA 年,卷(期): 2006 30(3) 分類號: Q343 關鍵詞: 泥鰍 大鱗副泥鰍 細胞色素P450芳香化酶 性別分化【兩種泥鰍芳香化酶基因的克隆與時空表達】相關文章:
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