枸杞中IPP異構(gòu)酶相關基因(IPI)的分離

時間:2023-04-27 21:52:53 生物醫(yī)學論文 我要投稿
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枸杞中IPP異構(gòu)酶相關基因(IPI)的分離

以寧夏枸杞葉片為材料,采用異硫氰酸胍-酚-氯仿法提取完整的總RNA,利用PolyATract mRNA I-solation System(Promega公司)分離mRNA,然后利用Universal RibocloneRcDNA Synthesis System(Promega公司)合成雙鏈cDNA,在cDNA末端連接上EcoR Ⅰ接頭,并與λExCell載體連接,利用PackageneLambda DNA Packaging System進行包裝,構(gòu)建出滴度為2.78×105pfu/mL,重組效率為88.1%的枸杞葉片cDNA文庫.用Digoxigenin(DIG)標記龍膽草IPI探針,并對枸杞葉片cDNA文庫進行篩選,獲得7個IPIcDNA陽性克隆.釋放質(zhì)粒后,進行酶切鑒定,IPI陽性克隆cDNA插入片段的大小為1.5kb左右.

作 者: 張愛香 季靜 王罡 抗艷紅 ZHANG Ai-xiang JI Jing WANG Gang KANG Yan-hong   作者單位: 張愛香,ZHANG Ai-xiang(河北北方學院農(nóng)學系,河北,張家口,075131;天津大學農(nóng)業(yè)與生物工程學院,天津,300072)

季靜,王罡,JI Jing,WANG Gang(天津大學農(nóng)業(yè)與生物工程學院,天津,300072)

抗艷紅,KANG Yan-hong(河北北方學院農(nóng)學系,河北,張家口,075131) 

刊 名: 西北農(nóng)業(yè)學報  ISTIC PKU 英文刊名: ACTA AGRICULTURAE BOREALI-OCCIDENTALIS SINICA  年,卷(期): 2006 15(3)  分類號: Q784  關鍵詞: 枸杞   葉片   cDNA文庫   IPI   基因   分離  

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