HBcAg和HBsAg前S1表位肽融合蛋白的表達(dá)研究

HBcAg和HBsAg前S1表位肽融合蛋白的表達(dá)研究

構(gòu)建、表達(dá)并純化了HBcAg與HBsAg前S1表位肽融合蛋白BTcs1,為開發(fā)新型HBV治療和預(yù)防性疫苗提供實(shí)驗(yàn)依據(jù).利用DNA重組技術(shù),構(gòu)建了HBcAg與HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表達(dá)質(zhì)粒pBTcs1,在大腸桿菌(HB101)中進(jìn)行表達(dá),用蔗糖密度梯度超速離心對(duì)表達(dá)產(chǎn)物BTcs1進(jìn)行純化,用SDS-PAGE、SEC、Western-blot和電鏡進(jìn)行鑒定.結(jié)果表明成功構(gòu)建了HBcAg與HBsAg前S1表位肽融合蛋白原核表達(dá)質(zhì)粒pBTcs1,BTcs1的表達(dá)量為20～25mg/L,DOT-BLOT結(jié)果顯示BTcs1主要分布在30%～50%蔗糖介質(zhì)中,SDS-PAGE和SEC結(jié)果顯示蛋白純度＞95%,Western-blot結(jié)果顯示BTcs1可以與抗HBcAg抗體和抗HBsAg前S1抗體特異雜交,顯色條帶在約28kDa處,電鏡分析表明BTcs1可以自主組裝成病毒樣顆粒(VLP),直徑約為30～34nm.為進(jìn)一步探討B(tài)Tcs1的功能及應(yīng)用奠定了基礎(chǔ).

作 者： 孫紅光 閆東梅 杜柏榕 朱迅 SUN Hong-guang YAN Dong-mei DU Bai-rong ZHU Xun   作者單位： 吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室,長春,130021  刊 名： 中國生物工程雜志  ISTIC PKU 英文刊名： CHINA BIOTECHNOLOGY  年，卷(期)： 2006 26(3)  分類號(hào)： Q81  關(guān)鍵詞： 乙肝病毒核心抗原(HBcAg)   前S1表位   融合蛋白   表達(dá)  

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